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激光共聚焦顯微鏡如何實現(xiàn)對樣品某一層的熒光信息進行掃描?

返回列表 來源:本站 發(fā)布日期:2024-06-18 10:35:42【

激光共聚焦顯微鏡實現(xiàn)對樣品某一層的熒光信息進行掃描的過程可以歸納如下:

光源與照明:

激光共聚焦顯微鏡采用激光束作為光源。

激光束經(jīng)照明針孔后形成點光源,并通過分光鏡反射至物鏡。

聚焦與掃描:

激光束聚焦于樣品上,對標本焦平面進行逐點、逐行、逐面的快速掃描。

通過控制調(diào)焦深度,可以精確地定位到樣品的某一層進行掃描。

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熒光收集與成像:

組織樣品中如果存在可被激發(fā)的熒光物質(zhì),這些物質(zhì)在受到激光照射后會發(fā)出熒光。

發(fā)出的熒光沿原入射光路反向回到分光鏡,并通過探測針孔進行聚焦。

聚焦后的熒光由光電倍增管(PMT)或冷電耦器件(CCD)接收,并轉(zhuǎn)化為電信號。

信號處理與顯示:

接收到的電信號被傳送到計算機進行處理和分析。

計算機通過圖像分析和模擬技術(shù),將掃描到的熒光信息轉(zhuǎn)化為可視的圖像。

用戶可以在計算機屏幕上觀察到所觀察表面的立體結(jié)構(gòu),并可以進一步對圖像進行處理和分析。

特點與優(yōu)勢:

激光共聚焦顯微鏡通過兩次聚焦(共聚焦)技術(shù),能夠精確控制掃描深度,從而獲得樣品不同深度層次的圖像。

與傳統(tǒng)熒光顯微鏡相比,激光共聚焦顯微鏡具有更高的對比度、分辨率和靈敏度,能夠?qū)崿F(xiàn)多重熒光的同時觀察和形成清晰的三維圖像。

綜上所述,激光共聚焦顯微鏡通過激光束的聚焦和掃描,結(jié)合熒光收集、信號處理和顯示等技術(shù),實現(xiàn)對樣品某一層的熒光信息的精確掃描和成像。

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